黄连解毒汤通过诱导自噬减轻脓毒症小鼠肝损伤

作者：杨李旺; 杨蓉; 赵焕新; 翟晓艳; 王惠洁; 周儒奎; 季新燕^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2022, 28(05): 71-76.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20220424

• 黄连解毒汤
• 脓毒症
• 肝损伤
• 自噬

目的:探讨黄连解毒汤对盲肠结扎穿孔术(CLP)诱导的脓毒症小鼠肝损伤保护作用中自噬相关蛋白的表达。方法:将60只8周龄C57BL/6小鼠随机分为假手术组、脓毒症模型组、黄连解毒汤低、高剂量组(1.44,2.88 g·kg-1)共4组(n=15)。连续给药3 d,末次给药1 h,盲肠结扎穿孔术建立脓毒症模型。观察小鼠24 h生存率;另取5只,术后12 h处死小鼠,收集血清和肝组织。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中炎症因子白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)的水平;生化法检测血中丙氨酸氨基转移酶(ALT),天冬氨酸氨基转移酶(AST)的水平;苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织的病理变化;TdT介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)染色观察肝细胞凋亡指数(AI);蛋白免疫印迹法检测肝组织中高迁移率族蛋白1(HMGB1),自噬效应蛋白1(Beclin1),自噬标志物微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ/Ⅰ(LC3-Ⅱ/Ⅰ)的表达。结果:与假手术组比较,模型组小鼠12,24 h生存率明显降低,血清中炎症因子IL-6,TNF-α,IL-1β水平明显升高(P<0.05),AST,ALT活性明显增加(P<0.05),肝细胞肿胀、炎症细胞浸润,肝细胞凋亡,HMGB1表达明显增加(P<0.05),自噬相关蛋白Beclin1的表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ增加(P<0.05);与模型组比较,各给药组脓毒症小鼠12,24 h生存率明显提高,炎症因子IL-6,TNF-α水平及AST,ALT活性明显降低(P<0.05),肝组织损伤明显减轻,肝细胞凋亡减少(P<0.05),HMGB1的表达明显减少(P<0.05),Beclin1的表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ明显增加(P<0.05)。结论:黄连解毒汤可能通过诱导自噬、抑制凋亡等机制,减轻CLP所致脓毒症小鼠肝损伤。

• 单位
  山西中医药大学; 基础医学院