黄牛、牦牛和犏牛睾丸组织Dazl基因实时荧光定量PCR检测方法的建立

作者：付永; 魏雅萍; 孟茹; 吴克选; 陈生梅; 张立成; 王谢忠

来源：西北农业学报, 2013, (01): 12-18.

• 犏牛
• 雄性不育
• Dazl
• 荧光实时定量PCR Cattle-yak
• Male infertility
• Dazl
• Real-time quantitative PCR

为了检测黄牛、牦牛和犏牛睾丸组织Dazl基因mRNA表达水平。利用GenBank中牛Dazl mRNA序列,在其保守区设计并合成特异性引物,以牛肌动蛋白基因(β-actin)为内参,建立实时荧光定量PCR方法。结果表明,在100～10-6 7个拷贝量重组质粒稀释范围内,Dazl和β-actin基因的Ct值与重组质粒的含量均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.999。熔解曲线产物为特异的单峰,具有较高的灵敏度和特异性。Dazl基因重组质粒最小检出含量达到10拷贝/μL,批内变异系数保持在1.351%以内,批间变异系数保持在3.217%以内,重复性较好。Dazl基因的mRNA表达量在犏牛睾丸组织中...

• 单位
  青海省动物疫病预防控制中心; 青海大学