虎源传染性鼻气管炎病毒gD基因重组真核表达载体的构建

作者：张晓明; 胡俊; 彭仕明; 陈武

来源：动物医学进展, 2014, 35(09): 70-73.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2014.09.004

• 虎源传染性鼻气管炎病毒
• gD基因
• 聚合酶链反应
• 真核表达

根据从虎气管组织扩增获得的猫传染性鼻气管炎病毒相关核酸序列,设计扩增编码虎源猫传染性鼻气管炎病毒gD蛋白基因片段的引物,通过PCR扩增出gD基因片段,并成功插入到pMD18-T Simple载体中,筛选获得重组质粒,命名为18T-gD。重组质粒通过HindⅢ和XhoⅠ酶切后,插入pcDNA 3.1(+)真核表达载体构建出gD基因的重组真核表达质粒pcDNA-gD。用脂质体将重组真核表达质粒pcDNA-gD转染293T细胞,通过RT-PCR和Western blot检测,结果显示gD基因在真核细胞中得到正确转录和表达,所表达蛋白分子质量约为42.29ku,为虎源猫传染性鼻气管炎基因疫苗的研究奠定了基础。

• 单位
  广州动物园; 华南农业大学