基于线粒体nad7基因的内含子序列3对俄罗斯野山参的分子鉴定

作者：李桂生^*

来源：神经药理学报, 2018, 8(06): 32-33.

目的:俄罗斯野山参药用价值较高且价格昂贵,因此人参的栽培品种在市场上常被用作俄罗斯野山参的混伪品。针对传统的形态学和化学鉴定法的不足,本研究旨在建立一种简单可靠的区分俄罗斯野山参和栽培人参的DNA分子标记方法,为俄罗斯野山参的鉴别提供客观标准。方法:对俄罗斯野山参、中国和韩国主要栽培人参品种的线粒体NADH脱氢酶亚基7(nad7)基因的内含子序列进行扩增,利用多重序列比对检测俄罗斯野山参的变异位点。通过人为引入错配碱基的方式设计俄罗斯野山参的特异性引物,并利用等位基因特异性PCR对俄罗斯野山参进行区分和鉴定。结果:在nad7第3个内含子中检测到了俄罗斯野山参的SNP位点。基于该SNP位点,通过在3′末端起第3个碱基处用T取代G设计了俄罗斯野山参的特异性引物。等位基因特异PCR结果显示,人参样品均产生了由通用引物扩增出992 bp的条带,而只有俄罗斯野山参扩增出了721 bp的特异性条带。利用实时等位基因特异PCR的终点分析方法可以简单地将俄罗斯野山参样品与人参栽培品种区分开来。讨论:本研究建立的等位基因特异性PCR检测方法具有简单、准确的特点,并且不受外部环境条件及样品生长发育阶段的影响,能有效地对俄罗斯野山参和栽培人参样品进行区分。因此,本方法可作为俄罗斯野山参鉴定的DNA分子手段,并可作为传统鉴定方法的有效补充。