长链非编码RNA MACC1-AS1调控AKT/m TOR通路介导胃癌顺铂耐药的研究

作者：努尔麦麦提·叶尔逊^*; 白洁

来源：中国普外基础与临床杂志, 2022, 29(04): 458-464.

• 长链非编码RNA
• 结肠癌相关转移基因1反义RNA
• 胃癌
• 耐药性
• 凋亡

目的 探讨长链非编码RNA结肠癌相关转移基因1反义RNA (metastasis-associated in colon cancer 1-antisense RNA,MACC1-AS1)在顺铂耐药胃癌中的作用及其可能机制。方法 选取人胃癌细胞株BGC823和顺铂耐药胃癌细胞BGC823/DDP为研究对象。对BGC823/DDP细胞进行转染，分为阴性对照组（si-NC组，转染si-NC空质粒）和MACC1-AS1基因沉默组（si-MACC1-AS1组，转染si-MACC1-AS1质粒）；同时对BGC823细胞进行转染，分为阳性对照组（pcDNA-NC组，转染pcDNA-NC空质粒）和MACC1-AS1基因过表达组（pcDNA-MACC1-AS1组，转染pcDNA-MACC1-AS1质粒）。采用MTT法检测细胞增殖抑制情况和细胞半抑制浓度（50%inhibiting concentration,IC50）值；采用流式细胞术检测细胞凋亡情况；采用实时荧光定量PCR检测细胞中MACC1-AS1、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关的X基因（Bax）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）、磷酸化mTOR (phosphorylated mTOR,p-mTOR)、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)和磷酸化AKT(phosphorylated AKT,p-AKT)的mRNA表达水平；采用Western blot法检测细胞Bax、Bcl-2、p-mTOR、mTOR、AKT和p-AKT蛋白表达水平。结果 BGC823/DDP细胞中MACC1-AS1 mRNA的相对表达量高于BGC823胃癌细胞（P<0.01）;si-MACC1-AS1组细胞中MACC1-AS1 mRNA相对表达量低于si-NC组（P<0.001）;pc DNA-MACC1-AS1组细胞MACC1-AS1 mRNA相对表达量高于pc DNA-NC组（P<0.000 1）。si-MACC1-AS1组的细胞生长抑制率和IC50值均高于si-NC组（P<0.001）;pcDNA-MACC1-AS1组的细胞生长抑制率和IC50值均低于pcDNA-NC组（P<0.001）。pcDNA-MACC1-AS1组细胞的Bcl-2、p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR的蛋白和mRNA相对表达量均高于pcDNA-NC组（P<0.01）,Bax蛋白和mRNA相对表达量低于pcDNA-NC组（P<0.01）;pcDNA-MACC1-AS1组的细胞凋亡率低于pcDNA-NC组（P<0.01）。si-MACC1-AS1组细胞的Bcl-2、p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR的蛋白和mRNA相对表达量均低于si-NC组（P<0.01）,Bax蛋白和mRNA相对表达量高于si-NC组（P<0.01）;si-MACC1-AS1组的细胞凋亡率高于si-NC组（P<0.01）。结论MACC1-AS1在顺铂耐药的胃癌细胞中高表达，MACC1-AS1过表达调控AKT/mTOR通路介导的细胞凋亡，增强胃癌细胞对顺铂的耐药性。

• 单位
  新疆医科大学第二附属医院