丙型肝炎病毒NS4A蛋白在胰腺细胞cDNA文库中的结合蛋白基因的筛选

作者：郭嘉祯; 冯志强; 李贲; 高萍; 杨玉英; 刘顺爱; 成军; 张锦前

来源：感染.炎症.修复, 2011, (04): 205-208.

• 人胰腺细胞cDNA文库
• 肝炎病毒
• 丙型
• NS4A蛋白 Pancreas cDNA library
• Hepatitis C virus
• NS4A protein

目的:从人胰腺细胞cDNA文库中筛选出与丙型肝炎病毒(HCV)NS4A蛋白存在相关作用并且参与糖、脂类代谢过程的结合蛋白,为研究HCV影响糖、脂类代谢的分子生物学机制提供实验依据。方法:构建pGBKT7-NS4A作为诱饵质粒,转化酵母菌株AH109,用SD/-Trp筛选阳性菌落。配合两种重组酵母菌株AH109与Y187(人胰腺细胞cDNA文库质粒转化),用四缺培养基及X-α-gal筛选蓝色酵母菌落,提取相应质粒,电转化感受态菌DH5α后再提取质粒,测序仪测序,结果使用PUMED进行序列比对。结果:用pGBKT7-HCVNS4A重组质粒作为诱饵,成功从人胰腺cDNA文库中筛选出5种与HCV NS...

• 单位
  中国人民解放军空军总医院; 首都医科大学附属北京地坛医院