人关节软骨细胞的体外分离、培养与鉴定

作者：童迅; 赵海恩; 张栋; 赵新文; 曾照辉; 马保安

来源：现代生物医学进展, 2012, (16): 3040-3044.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2012.16.019

• 人关节软骨
• 软骨细胞
• 细胞学 Human articular cartilage
• Chondrocytes
• Cytology

目的:研究人关节软骨细胞的体外分离、培养及鉴定方法,观察各代人关节软骨细胞的形态学特性。方法:取人创伤性截肢的无菌膝关节软骨,采用两步酶消化法分离培养人关节软骨细胞,并进行传代培养。通过倒置相差显微镜下观察细胞形态,绘制生长曲线,甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色对细胞进行鉴定。结果:两步酶消化法消化出的软骨细胞呈圆形,培养2-3天,细胞贴壁、变形,呈三角形或多角形,2周左右细胞融合成层,传代5次后出现去分化。软骨细胞增殖和生长缓慢。形态学、免疫组织化学染色显示细胞培养5代以内可以保持表型的稳定。结论:本研究采用胰蛋白酶及Ⅱ型胶原酶联合消化法获得大量高纯度、高活性的人关节软骨细胞。5代以内...

• 单位
  第四军医大学