干扰UCH-L3对牛骨骼肌卫星细胞增殖与分化的影响

作者：胡蕾; 朱菲菲; 王轶敏; **林; 李新; 郭益文; 郭宏; 丁向彬^*

来源：中国畜牧杂志, 2020, 56(11): 95-99.

DOI：10.19556/j.0258-7033.20191210-02

• UCH-L3
• 牛骨骼肌卫星细胞
• 增殖
• 分化

实验旨在探究泛素蛋白酶体中羧基末端水解酶L3(UCH-L3)对牛骨骼肌卫星细胞增殖和分化的影响。使用已经建立的牛骨骼肌卫星细胞体外成肌分化模型,体外模仿骨骼肌的发育过程,设计并合成UCH-L3的si-RNA,转染牛骨骼肌卫星细胞,筛选出有显著干扰效果的si-RNA。用EdU染色检测干扰UCH-L3对细胞增殖的影响。用免疫荧光的方法检测干扰UCH-L3表达后对肌管形成的影响,并采用Western blot技术检测分化后分化标志基因MyHC表达水平的变化,综合分析干扰UCH-L3对牛肌卫星细胞成肌分化的影响。结果表明:干扰UCH-L3后肌卫星细胞EdU染色阳性率与对照组无明显差异;干扰UCH-L3后分化形成肌管的数量少于对照组,肌管融合指数显著低于对照组,分化标志因子MyHC的蛋白水平显著低于对照组。本研究结果表明,干扰UCH-L3的表达能够抑制牛骨骼肌卫星细胞的成肌分化过程。

• 单位
  天津农学院