激活蛋白2家族基因真核表达载体的构建及其功能鉴定

作者：米月; 蒋琦炜; 沈雁婕; 张德宇^*; 叶棋浓^*

来源：基础医学与临床, 2022, 42(12): 1829-1834.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2022.12.1829

• 人AP-2基因家族
• 肝癌
• 真核表达
• HepG2细胞系

目的 构建激活蛋白2(AP-2)家族真核表达载体，探究AP-2α、AP-2β、AP-2γ对人肝癌细胞系HepG2增殖及迁移的影响。方法 模板为人卵巢文库，通过PCR扩增AP-2α、AP-2β以及AP-2γ,并与载体pCDNA3.0-FLAG连接得到真核表达载体pCDNA3.0-FLAG-AP-2α/β/γ;通过CCK8法、克隆形成实验和划痕实验分别验证AP-2α、AP-2β以及AP-2γ对肝癌HepG2细胞增殖和迁移的影响。结果 成功构建了AP-2基因家族主要成员AP-2α、AP-2β、AP-2γ的真核表达载体，经酶切及基因测序鉴定重组质粒AP-2家族转录因子构建成功，并且能够成功表达；同时经过功能鉴定，显示AP-2家族蛋白可以显著抑制HepG2细胞的增殖以及迁移(P<0.05)。结论 构建的AP-2家族基因真核表达载体转染至HepG2细胞后，明显抑制HepG2细胞增殖和迁移。