载脂蛋白E影响星形胶质细胞基质金属蛋白酶-9表达的机制研究

作者：蓝岚; 黄帆; 唐玉兰^*; 张栋亮; 刘秋红; 罗春芳

来源：中风与神经疾病杂志, 2020, 37(05): 388-392.

DOI：10.19845/j.cnki.zfysjjbzz.2020.0352

• 载脂蛋白E
• 星形胶质细胞
• MMP-9
• TNF-α
• NF-κB信号通路

目的探讨载脂蛋白E(Apo E)影响星形胶质细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的机制。方法(1)体外培养C57BL/6J种属的野生型(WT)和Apo E基因敲除型(Apo E-/-)乳鼠的星形胶质细胞,利用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体行免疫荧光染色鉴定星形胶质细胞。(2)将WT和Apo E-/-乳鼠星形胶质细胞分别分为空白对照组(Control组)、阴性对照组(NC组)和阳性沉默组(KD组),Control组不加任何病毒,NC组加入阴性对照慢病毒,KD组加入沉默p65基因的阳性慢病毒,用siRNA慢病毒沉默星形胶质细胞核因子-κB(NF-κB) p65基因,抑制NF-κB信号转导,应用Western blot检测NF-κB p65蛋白的表达,ELISA法检测细胞MMP-9和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度。(3)用TNF-α刺激上述各组细胞24h,ELISA法检测刺激前后各组细胞MMP-9的浓度。结果(1) KD组两种细胞NF-κB p65蛋白的表达水平、MMP-9和TNF-α的浓度均显著低于Control组和NC组(P <0. 05);而Control组和NC组细胞NF-κB p65蛋白的表达水平、MMP-9和TNF-α的浓度间的差异无统计学意义(P> 0. 05)。(2) Apo E-/-细胞MMP-9和TNF-α的浓度在Control组和NC组中均高于WT细胞(P <0. 05);而在KD组中与WT细胞无明显差异(P>0. 05)。(3) TNF-α刺激24h后,Control组和NC组两种细胞MMP-9的浓度均升高(P <0. 05);而KD组MMP-9的浓度无明显变化(P> 0. 05)。结论 Apo E可能通过TNF-α/NF-κB信号通路影响星形胶质细胞MMP-9表达,从而影响血脑屏障的完整性。

• 单位
  神经内科; 广西医科大学第一附属医院; 荆州市第一人民医院