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摘要
目的 比较基因重组胰蛋白酶和猪源胰蛋白酶在腮腺炎减毒活疫苗中的使用效果。方法 使用浓度为10%、15%、20%基因重组胰蛋白酶制备鸡胚成纤维细胞，通过细胞密度、细胞活性、24h以及48h细胞贴壁状态等指标确定基因重组胰蛋白酶使用浓度；与猪源胰蛋白酶进行比较，通过细胞密度、细胞活性、48h细胞贴壁状态以及病毒滴度等指标比较两种胰蛋白酶的使用效果；使用基因重组胰蛋白酶制备3批腮腺炎减毒活疫苗，检定疫苗的稳定性；规模化放大验证该工艺的稳定性。结果 通过研究发现基因重组胰蛋白酶的使用浓度为15%；与猪源胰蛋白酶进行比较，两种胰酶制备的细胞密度水平一致，无显著性差异（P> 0.05）,48 h后细胞均生长至单层，细胞状态良好，按照同一MOI进行接毒，病毒滴度无显著性差异（P> 0.05）；使用CF-10进行试验，病毒滴度也无差异（P> 0.05）；连续3批使用基因重组胰蛋白酶制备的疫苗热稳定性良好，且该工艺可以规模化放大。结论 在制备腮腺炎减毒活疫苗中可以使用浓度15%的基因重组胰蛋白酶替代猪源胰蛋白酶，作为鸡胚成纤维细胞消化液使用。
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单位北京民海生物科技有限公司
