微小RNA-8085在膀胱癌组织中的表达及对膀胱癌J82细胞侵袭和增殖的影响

作者：王斌; 张志敏; 宋扬; 何轩; 金丰; 王阁; 李建^*

来源：山西医科大学学报, 2019, 50(07): 954-959.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2019.07.016

• 微小RNA-8085
• 膀胱癌
• 细胞侵袭
• 细胞增殖
• 生物信息学
• 拓扑异构酶Ⅱα

目的分析微小RNA-8085(miR-8085)在膀胱癌组织中的表达及其对膀胱癌J82细胞侵袭和增殖的影响,并探究其分子机制。方法实时定量PCR(qPCR)检测32例膀胱癌和癌旁组织中miR-8085的表达水平。以携带miR-8085的慢病毒或阴性对照慢病毒感染J82细胞,命名为实验组和对照组,qPCR检测转染效率。Transwell侵袭实验和四甲基偶氮唑蓝(MTT)法分别检测感染后J82细胞的侵袭能力和增殖能力。生物信息学方法预测miR-8085可能的靶基因。双荧光素酶报告基因实验验证miR-8085与靶基因mRNA的结合。qPCR和Western blot检测感染后J82细胞中靶基因在mRNA和蛋白水平的表达量。结果膀胱癌组织和癌旁组织中miR-8085的表达量分别为2.50±0.78和7.35±0.92(P <0.01)。与对照组相比,实验组J82细胞中miR-8085的表达量显著增加(P <0.01)。对照组和实验组中J82穿膜细胞数分别为82.63±7.60和35.45±11.27,实验组J82细胞的侵袭能力显著被抑制(P <0.05)。实验组J82细胞的增殖能力从第3天开始显著被抑制(P <0.05)。生物信息学方法显示,miR-8085可能的靶基因是拓扑异构酶Ⅱα(TOP2A)。双荧光素酶报告基因实验显示,miR-8085可与TOP2A mRNA 3’非翻译区靶向结合。实验组J82细胞株中TOP2A基因在mRNA和蛋白水平的表达量均显著减少(P <0.01)。结论 miR-8085在膀胱癌中表达明显降低,过表达miR-8085可通过干扰TOP2A基因的表达,抑制膀胱癌J82细胞的侵袭和增殖能力,可能成为膀胱癌治疗的潜在靶点。

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学; 大坪医院