结核分枝杆菌分泌蛋白MPB64表达纯化

作者：石华; 戈朝晖; 贾伟; 马小明; 牛宁奎; 董辉; 王自立

来源：宁夏医科大学学报, 2011, (08): 704-707.

DOI：10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2011.08.001

• 结核分枝杆菌
• MPB64
• 免疫印迹
• 蛋白表达纯化 mycobacterium bovis
• MPB64
• western blot
• protein purification expression

目的表达并纯化结核分枝杆菌重组蛋白pET32a-MPB64。方法将构建好的表达载体pET32a-MPB64测序后,转化到大肠杆菌BL21(DE3)内。经IPTG诱导,在大肠杆菌BL-21中表达,用SDS-PAGE和免疫印迹分析表达产物并进行蛋白纯化。结果质粒pET32a-MPB64经测序,结果与Geneback中的结核分枝杆菌标准菌株H37RV核苷酸序列基本一致;SDS-PAGE分析表明,该融合蛋白以可溶性的形式表达,其分子质量约为24 kDa,蛋白表达量约占菌体总蛋白的20%;该蛋白经MagExtractor-His-tag-磁珠纯化试剂盒纯化后浓度达2.49mg.mL-1;Western-...

• 单位
  宁夏医科大学; 宁夏医科大学总医院