地舒单抗对人脐带间充质干细胞增殖及成骨分化的作用研究

作者：刘修志; 孟昊业; 赵金娟; 王鹏; 林万程; 王恺; 管延军; **; 许文静; 彭江^*

来源：解放军医学院学报, 2022, 43(04): 449-454.

• 地舒单抗
• 人脐带间充质干细胞
• 增殖
• 成骨分化
• 股骨头骨坏死

背景地舒单抗是一种RANKL抑制剂，具有抑制破骨细胞的作用。人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)具有成骨分化的能力。二者联合能否用于治疗股骨头坏死尚无定论。目的 研究地舒单抗对hUC-MSCs增殖及成骨分化的作用。方法 培养hUC-MSCs，使用生长状态良好的第3代hUC-MSCs进行实验。以含不同浓度地舒单抗(0.6 mg/mL、0.06 mg/mL、0.006 mg/mL)的hUC-MSCs成骨分化诱导培养基干预细胞作为实验组，以不含地舒单抗的hUC-MSCs成骨分化诱导培养基干预细胞作为对照组。使用CCK-8法检测不同组细胞的增殖活性；茜素红染色和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色分别检测各组细胞的成骨分化能力；实时荧光定量聚合酶链反应(qRTPCR)检测各组细胞的ALP、锌指结构转录因子Osterix(OSX)、Ⅰ型胶原酶(typeⅠcollagenase,COL-Ⅰ)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX-2)的mRNA表达量。结果 通过流式细胞技术鉴定，hUC-MSCs可表达干细胞表面标志蛋白，且hUC-MSCs具有三系分化能力；与对照组相比，不同浓度地舒单抗(0.6 mg/mL、0.06 mg/mL、0.006 mg/mL)对hUC-MSCs具有促进增殖的作用，结果有统计学差异(P<0.05)。当地舒单抗的浓度为0.006 mg/mL时，ALP/OSX/COL-Ⅰ/RUNX-2的表达量高于对照组(P<0.05);0.006 mg/mL地舒单抗处理的hUC-MSCs成骨分化能力较对照组增强(P<0.05)，随着浓度的增加，h UC-MSCs的成骨分化能力降低，低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 当地舒单抗的浓度为0.006 mg/mL时，能促进hUC-MSCs的增殖及成骨分化，高浓度(0.6 mg/mL、0.06 mg/mL)的地舒单抗抑制hUC-MSCs的成骨分化。

• 单位
  解放军总医院