乳腺炎对牛奶外泌体功能的影响：基于乳腺上皮细胞的观察

作者：应易恬; 杨璟; 严冰璇; 邵冯金; 谭勋^*

来源：浙江大学学报(农业与生命科学版), 2020, 46(03): 383-390.

• 牛奶
• 外泌体
• 乳腺上皮细胞
• 促炎细胞因子

通过观察乳腺炎牛奶外泌体对乳腺上皮细胞(mammary epithelial cells, MECs)活力和天然免疫功能的影响,探究外泌体在乳腺炎发病机制中的作用。MECs经热灭活的乳腺炎病原(大肠埃希菌)刺激24 h后进行转录组测序和基因本体(gene ontology, GO)富集分析,发现有21条差异表达基因富集在细胞外囊泡外泌体(GO:0070062)这一细胞组分上,提示感染可引起宿主细胞外泌体生物学功能改变。在此基础上,采用正常牛奶来源的外泌体(N-exo)和乳腺炎牛奶来源的外泌体(M-exo)作用MECs,以培养于不含外泌体的培养基中的细胞为对照,采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(methyl-thiazol-diphenyltetrazolium, MTT)法检测细胞活力,并采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测MECs中白细胞介素8(interleukin-8, IL-8)、白细胞介素1β(interleukin-1β, IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)的表达。结果发现:正常牛奶外泌体对MECs活力无显著影响,而乳腺炎牛奶外泌体可显著抑制MECs活力;2种来源的外泌体对IL-8和TNF-α的表达均无显著影响,但正常牛奶外泌体可诱导表达IL-1β,而乳腺炎牛奶外泌体则缺乏诱导IL-1β表达的能力。上述结果提示,在乳腺感染过程中,进入牛奶中的外泌体可引起MECs活力下降,并可能参与介导有利于病原逃避免疫的微环境的形成。因而,在乳腺炎发病机制中,外泌体可能起着促进乳腺感染扩散的作用。

• 单位
  浙江大学; 动物科学学院