凡纳滨对虾RASSF基因克隆及其响应不同病原刺激的表达分析

作者：肖伟; 戚建英; 姚元茂; 史黎黎^*

来源：南方农业学报, 2023, 54(09): 2665-2673.

• 凡纳滨对虾
• RASSF基因
• Hippo信号通路
• 组织表达
• 先天性免疫

【目的】明确凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）RASSF基因（LvRASSF）的分子结构、组织表达模式及其应答不同病原感染的表达特征，为深入研究LvRASSF基因在凡纳滨对虾先天性免疫中的功能及作用机制打下基础。【方法】利用PCR克隆得到LvRASSF基因开放阅读框（ORF）序列，并对其进行生物信息学分析及构建系统发育进化树，运用实时荧光定量PCR分析LvRASSF基因在12个组织中的表达情况及不同病原感染后的表达变化。【结果】LvRASSF基因ORF序列长669 bp，共编码222个氨基酸残基，蛋白分子量为89.2 kD，理论等电点（pI）为5.06。LvRASSF氨基酸序列包含1个RA结构域和1个SARAH结构域。基于RASSF氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树显示，凡纳滨对虾与斑节对虾（Penaeus monodon）和中国对虾（Penaeus chinensis）的亲缘关系较近。LvRASSF基因在各组织中均有表达，其中在血细胞中的相对表达量最高，在眼柄中的最低。感染白斑综合征病毒（White spot syndrome virus,WSSV）和十足目虹彩病毒（Decapod iridescent virus 1,DIV1）后，LvRASSF基因在凡纳滨对虾鳃组织中的相对表达量极显著上调（P<0.01，下同），而在血细胞中短期极显著上调后又极显著下调；感染副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus,VP）后LvRASSF基因在凡纳滨对虾鳃和血细胞中的相对表达量整体呈上调趋势。【结论】LvRASSF蛋白存在RASSF家族典型的RA结构域和SARAH结构域，在进化上较保守。LvRASSF基因广泛表达于凡纳滨对虾各组织中，以血细胞中的相对表达量最高。不同病原感染后LvRASSF基因在血细胞和鳃组织中相对表达量发生极显著变化，表明LvRASSF基因在凡纳滨对虾的抗病免疫中发挥重要作用。

• 单位
  广东海洋大学深圳研究院; 广东海洋大学