AGPAT4基因干扰及过表达对西农萨能奶山羊乳腺上皮细胞脂代谢的影响

作者：姚玮玮; 罗军^*; 王馨培; 屈小鹏; 田慧彬; 牛慧敏

来源：农业生物技术学报, 2023, 31(09): 1868-1877.

• 西农萨能奶山羊
• 溶血磷脂酸酰基转移酶4(AGPAT4)
• 脂代谢
• 山羊乳腺上皮细胞(GMECs)

溶血磷脂酸酰基转移酶4(1-acylglycerol-3-phosphate O-acyltransferase 4, AGPAT4)是1-酰基甘油-3-磷酸O酰基转移酶家族的成员，具有催化甘油三酯合成的作用。为了阐明AGPAT4在山羊(Capra hircus)乳腺上皮细胞(goat mammary epithelial cells, GMECs)中的基因序列、结构以及AGPAT4对GMECs脂肪酸合成代谢的影响。本研究以西农萨能奶山羊乳腺上皮细胞为实验材料，通过RT-PCR克隆AGPAT4基因，应用在线网站进行生物信息学分析，干扰与过表达AGPAT4进行功能分析。结果表明，本研究成功克隆得到AGPAT4基因CDS区1 137 bp(sequence ID:XM＿005684959.3)，编码378个氨基酸，蛋白分子量为43 939.35 u，理论pI值为8.92，存在跨膜结构，无信号肽，为携带正电荷的不稳定蛋白；AGPAT4蛋白与AGPAT1、AGPAT2、脂蛋白3(lipin3, LPIN3)、二酰基甘油激酶(diacylglycerol kinases, DGK)、磷脂酶D(phospholipase D, PLD)、胞苷二磷酸-二酰基甘油合成酶(cytidine diphosphate-diacylglycerol synthase,CDS)等蛋白存在互作关系；干扰AGPAT4显著下调乙酰辅酶A羧化酶(acetyl coa carboxylase, ACC)基因表达(P<0.05)；过表达AGPAT4显著上调硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-coenzyme A desaturase, SCD1)与ACC基因表达(P<0.05)并显著促进细胞内甘油三酯积累(P<0.05)。以上结果表明，AGPAT4基因在山羊乳腺上皮细胞中对脂合成具有正向调控作用。本研究为后续开展AGPAT4基因对羊奶乳脂代谢的调控机制研究提供了基础资料。

• 单位
  动物科技学院; 西北农林科技大学