HOXB3促进骨肉瘤细胞增殖、克隆形成、迁移和抑制细胞凋亡的机制研究

作者：罗凯; 段华彬; 罗明鼎; 宋世杰

来源：现代检验医学杂志, 2022, 37(01): 136-181.

• 骨肉瘤
• 同源异型盒基因B3
• 染色质免疫共沉淀技术3
• 增殖
• 克隆形成
• 迁移
• 凋亡

目的 探究同源异型盒基因B3(homeobox genes B3, HOXB3)对骨肉瘤细胞增殖、克隆形成、迁移和凋亡的影响及其潜在分子机制。方法 检测2020年1月～12月在雅安市第二人民医院骨科行手术治疗的30例骨肉瘤患者病理组织及邻近正常组织中HOXB3表达；通过转染干扰siRNA敲低HOXB3表达，验证其转染效率；采用细胞增殖实验、克隆形成实验、细胞划痕实验及细胞凋亡实验分别探究敲低HOXB3对骨肉瘤细胞增殖、克隆形成、迁移和凋亡的影响；分析CDCA3在骨肉瘤中的表达特征及与HOXB3的相关性，通过染色质免疫共沉淀技术（chromatin immunoprecipitation,ChIP）分析和荧光素酶报告基因实验验证HOXB3和细胞分裂周期相关蛋白3(cell division cycle associatedfprotein 3,CDCA3)结合关系；验证HOXB3和CDCA3表达调控对骨肉瘤细胞生物学行为的作用机制。结果 30例骨肉瘤临床组织中HOXB3表达（41.154±8.626）较邻近正常组织（22.857±7.512）显著升高，差异有统计学意义（t=8.975,P<0.001）。敲低HOXB3表达后，骨肉瘤细胞增殖率、克隆形成率和迁移率明显降低（F=37.477～399.842，均P <0.001），细胞凋亡率显著升高（F=10.556,P=0.011）。骨肉瘤组织中CDCA3表达（38.624±7.736）明显高于邻近正常组织（21.875±6.482），差异有统计学意义（t=9.090,P <0.001）;HOXB3与CDCA3表达呈正相关（r=0.736,P <0.01）。CDCA3是HOXB3的靶基因；敲低HOXB3表达显著降低了骨肉瘤细胞中CDCA3表达（F=694.283,P <0.001）。HOXB3可结合CDCA3的启动子区域正调控CDCA3的表达；在敲低HOXB3表达的细胞中回补CDCA3，逆转了HOXB3对骨肉瘤细胞增殖、克隆形成、迁移、凋亡的抑制/促进作用。结论 HOXB3在骨肉瘤中表达上调，其可能通过与CDCA3启动子区域结合，正向调控CDCA3表达促进了骨肉瘤细胞的增殖、克隆形成及迁移，抑制了细胞凋亡，可作为临床骨肉瘤治疗的潜在药物靶点。

• 单位
  雅安市雨城区人民医院