摘要
目的研究miR-496在胃癌细胞中的表达情况, 并探讨其在胃癌细胞增殖和凋亡过程中的作用及机制。方法实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-496在正常胃上皮细胞株和胃癌细胞系AGS、MKN45中的的表达情况。在表达水平最低的AGS细胞中敲低miR-496, 同时设置阴性对照组和空白对照组。分别用CCK8实验和流式细胞仪检测细胞增殖和凋亡。使用生物信息学软件筛选出miR-496的靶基因LYN, QPCR检测转染miR-496对LYN表达的影响, 随后进行了Rescure拯救实验, 进一步研究miR-496通过调控LYN对胃癌细胞的作用机制。利用GraphPad Prism 9软件进行数据分析, 计量资料以均数±标准差(±s)表示, 组间比较采用t检验。结果 miR-496在AGS、MKN45中表达显著低于胃正常上皮细胞(P<0.05)。通过转染过表达miR-496后, 可以抑制AGS细胞的增殖, 同时可以使AGS细胞的凋亡比例明显升高(P<0.05)。qPCR结果显示, miR-496过表达组能够抑制LYN的表达(P<0.05)。生物信息学分析显示, miR-496与LYN激酶(LYN) 3’UTR区域结合, 通过过表达miR-496可抑制AGS细胞中LYN的表达, 而CCK8拯救实验显示过表达LYN能够解除miR-496对细胞增殖的抑制作用;流式凋亡检测显示表达LYN能够解除miR-496对细胞凋亡的促进作用(P<0.05)。结论 miR-496在胃癌细胞中低表达, 其通过靶向胃癌细胞中LYN的表达抑制胃癌细胞的增殖, 促进胃癌细胞的凋亡。
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单位承德医学院附属医院