N-Ac-PGP通过激活TLR4诱导巨噬细胞的M1极化并提高慢性阻塞性肺疾病炎症水平

作者：刘倩; 杨姣; 石西南; 徐悦; 杜晓华

来源：中国病理生理杂志, 2023, 39(11): 2060-2066.

DOI：10.3969/j.issn.1000-4718.2023.11.017

• 慢性阻塞性肺疾病
• N-乙酰化脯氨酸-甘氨酸-脯氨酸
• Toll样受体4
• 巨噬细胞极化
• 炎症

目的：探究N-乙酰化脯氨酸-甘氨酸-脯氨酸（N-acetylated proline-glycine-proline, N-Ac-PGP）通过Toll样受体4(Toll-like receptor 4, TLR4)诱导巨噬细胞M1极化对慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease, COPD）炎症反应的影响。方法：检测COPD患者痰液中N-Ac-PGP和M1型巨噬细胞炎性细胞因子的表达。体外培养人单核细胞白血病细胞THP-1，使用佛波脂（phorbol 12-myristate 13-acetate, PMA）诱导使之分化为M0型巨噬细胞，然后使用脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）和N-Ac-PGP诱导M0型巨噬细胞极化为M1型。采用RTqPCR和Western blot法分别检测巨噬细胞表面标志物CD11b、CD45、CD86和诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase, iNOS）的mRNA和蛋白表达水平。使用ELISA检测M1型巨噬细胞炎性细胞因子肿瘤坏死因子α(tu-mor necrosis factor-α, TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β, IL-1β)、IL-6和IL-23的水平。最后抑制TLR4通路，再次检测巨噬细胞的极化情况。结果：N-Ac-PGP与M1型巨噬细胞炎性细胞因子表达量呈显著正相关。PMA处理THP-1细胞成功诱导分化为M0型巨噬细胞。LPS和N-Ac-PGP处理后M1型巨噬细胞的标志蛋白表达显著增加（P<0.05），证明经过LPS和N-Ac-PGP处理的M0型巨噬细胞向M1型极化。同时，炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-23的表达上调（P<0.05）。进一步的实验中，TLR4抑制剂与N-Ac-PGP联用逆转了N-Ac-PGP对M0型巨噬细胞向M1型极化的促进作用，也显著降低了炎性细胞因子的表达水平（P<0.05）。结论：N-Ac-PGP通过激活TLR4诱导的巨噬细胞M1极化促进COPD炎症反应。

• 单位
  昆明医科大学第一附属医院; 云南中医药大学