摘要

反硝化是生态系统氮循环的最后一环同时也是活性氮转化为惰性氮(N_(2))的最主要过程。由于空气中背景N_(2)浓度高达78%,在如此高的背景浓度N_(2)环境中直接和准确测定反硝化过程产生的微量N_(2),一直是个巨大的挑战。Robot系统(Robotized incubation and analyzing system)是基于无N_(2)背景(氦环境)的用以研究纯菌或土壤体系N_(2)排放速率的方法,该系统平台搭建简单且测定效率高,目前应用比较广泛。但该系统在运行过程中需要频繁利用微量注射器进行取样和测定,极易造成外界N_(2)的渗漏。为解决这一问题,通过使用预先置于氦环境的橡胶隔垫、采用充氦后的蒸馏水配制溶液及实施破坏性取样的处理,对Robot系统测定旱地N_(2)排放速率的方法进行优化,同时与乙炔抑制法和RoFlow系统(Robotized continuous flow incubation system)的测定结果进行对比。研究结果表明,通过方法优化,可以大幅降低Robot系统的N_(2)渗漏率,方法优化后系统的渗漏率在0~0.78 μL·L~(-1)·h~(-1)之间。优化后的Robot系统对碳源和氮源添加后N_(2)排放速率差异的响应较好,并且对旱地土壤N_(2)排放速率的测定误差最小(0.003~0.045 mg·kg~(-1)·d~(-1)),显著优于乙炔抑制法(0.34~3.29 mg·kg~(-1)·d~(-1))和RoFlow系统(0.41~1.02 mg·kg~(-1)·d~(-1))。综上,优化后的Robot系统在测定旱地N_(2)排放速率时具有N_(2)渗漏率低,对外源底物添加响应好及测定结果精确度高的特点,未来在研究旱地土壤背景N_(2)排放及相关机理方面有较好的应用前景。