再生基因4(Reg Ⅳ)的原核表达、蛋白结构复性及纯化

作者：徐杨; 张学良; 杜惠芬; 柴丹丹; 连晓雯; 张瑞君; 李克生^*

来源：甘肃医药, 2020, 39(07): 577-588.

DOI：10.15975/j.cnki.gsyy.2020.07.001

• 再生基因4
• 原核表达
• 纯化

目的:构建再生基因4(Reg Ⅳ)的原核表达载体,获得重组人Reg Ⅳ蛋白。方法:将已构建好的pEGFP-C1-Reg Ⅳ质粒进行酶切纯化获得目的基因,并构建到pET-30a原核表达载体上,经测序鉴定后将序列正确的重组质粒转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE凝胶电泳鉴定,并用凝胶层析对表达产物进行复性纯化。结果:构建了pET-30a-Reg Ⅳ原核表达重组质粒,IPTG诱导表达出约22KD的重组蛋白,表达产物经复性纯化后获得纯度较高的目的蛋白。结论:成功构建了Reg Ⅳ原核表达载体,并成功表达了重组人Reg Ⅳ蛋白。

• 单位
  甘肃省肿瘤医院; 甘肃省医学科学研究院