大鼠颏舌肌成肌细胞的分离和鉴定

作者：丁王辉; 陈小燕; 李文; 施洁珺

来源：口腔医学, 2015, 35(07): 521-524.

DOI：10.13591/j.cnki.kqyx.2015.07.003

• 颏舌肌
• 成肌细胞
• 酶消化法
• 差速贴壁法
• 肌管

目的建立大鼠颏舌肌成肌细胞体外培养方法,观察成肌细胞生物学特性。方法取新生3 d内SD大鼠,机械法分离颏舌肌组织,应用胶原酶、胰蛋白酶两步消化法获得成肌细胞,差速贴壁法纯化细胞,细胞计数法绘制生长曲线,α-sarcomeric actin免疫细胞化学鉴定细胞来源。结果成功获得大鼠颏舌肌成肌细胞,超过90%的细胞α-sarcomeric actin染色阳性,证明其为骨骼肌细胞来源。体外培养的成肌细胞呈现良好的增殖和分化能力,在生长培养基中细胞的倍增时间为4~5d,高密度时细胞相互接触融合形成肌管。结论消化法与差速贴壁法结合能够获得足量、纯净的颏舌肌成肌细胞,所得细胞增殖力强,能表达骨骼肌特异性蛋白。

• 单位
  浙江大学医学院附属口腔医院