新型鸭呼肠孤病毒动物感染模型的建立

作者:罗丹; 刘芮; 高玉龙; 李凯; 刘长军; 祁小乐; 崔红玉; 张艳萍; 潘青; 高立; 王笑梅*
来源:中国预防兽医学报, 2022, 44(04): 382-422.

摘要

为了建立新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)动物感染模型,本研究利用 NDRV 代表株 SD19/6201,分别以105.0ELD50/0.1 mL(低剂量)和106.0ELD50/0.1 mL(高剂量)感染14日龄、21日龄SPF麻鸭,分别于感染后第5 d、第7 d迫杀雏鸭,观察脾脏剖检变化并统计其病变率。结果显示,14 日龄雏鸭低剂量感染组在感染后第 5 d 脾脏病变以出血点/斑为主,病变率为 70%(7/10),感染后第 7 d 脾脏上述病变更加明显,病变率为 80%(8/10);高剂量感染组雏鸭剖检脾脏病变比低剂量感染组明显,出现黄白色坏死灶,感染后第 5 d、第 7 d 脾脏病变比率分别为 100%(10/10)和 90%(9/10)。21 日龄低剂量感染组雏鸭感染后第 5 d、第 7 d 脾脏出血或坏死的比率明显低于相同剂量的 14 日龄雏鸭感染组,脾脏病变率分别为 60%(6/10)和 40%(4/10),高剂量感染组雏鸭感染后第 5 d、第 7 d 脾脏出现出血、坏死的比率均为 80%(8/10)。14 日龄和 21 日龄雏鸭感染后第 5 d 不同剂量感染组脾脏指数均明显高于对照组,感染后第 7 d 各感染组雏鸭脾脏肿大程度有所恢复,脾脏指数与对照组差异不明显,但脾脏坏死症状并未恢复。脾脏病理变化结果显示,与 14 日龄雏鸭感染组相比,21 日龄雏鸭感染组脾脏组织病理变化程度更轻,与剖检病变基本一致。采用 Taq Man 荧光定量 RT-PCR 方法检测各组雏鸭脾脏病毒载量,结果显示,感染后第 5 d 即可在各感染组雏鸭脾脏中检测到大量的病毒,且 14 日龄雏鸭感染组脾脏病毒载量高于 21 日龄雏鸭感染组,各日龄感染雏鸭高剂量感染组脾脏病毒载量均高于低剂量感染组。以上结果表明,NDRV 对 14 日龄雏鸭最佳感染剂量是 105.0ELD50/0.1 mL,NDRV 对 21 日龄雏鸭最佳感染剂量是 106.0ELD50/0.1 mL,最佳剖检时间为感染后第7 d。本研究首次建立了 NDRV 动物感染模型,为该病毒后期疫苗质量标准的研究提供了重要依据。