自噬诱导、抑制的人三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231中ATG2A和ATG9A表达观察

作者：杨鑫娇; 邹迪; 熊喆; 张海珠; 夏从龙; 赵红业^*

来源：山东医药, 2021, 61(21): 13-17.

• 乳腺肿瘤
• 三阴性乳腺癌
• ATG2A基因
• ATG9A基因
• 细胞自噬
• MDA-MB-231细胞

目的观察自噬诱导、抑制的人三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231中ATG2A、ATG9A表达变化。方法人三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231分为4组,对照组加入DMEM培养液正常培养,Baf-A1组在DMEM培养液中加100 nmol/L的巴弗洛霉素A1(Baf-A1)进行自噬阻断,EBSS组加入Earle’s平衡盐溶液(EBSS)进行饥饿诱导细胞自噬,EBSS+Baf-A1组在EBSS培养液中加入100 nmol/L的Baf-A1,四组均培养4 h。采用实时荧光定量(Q-PCR)法检测各组细胞中ATG2A、ATG9A mRNA,采用Western Blotting法检测各组细胞中ATG2A、ATG9A、P62、微管蛋白1轻链3(LC3)蛋白,计算LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ。结果与对照组、Baf-A1组相比,EBSS组、EBSS+Baf-A1组细胞中ATG2A、ATG9A mRNA相对表达量均显著升高(P均<0.05),且EBSS+Baf-A1组细胞中ATG9A mRNA相对表达量高于EBSS组(P均<0.05)。与对照组、Baf-A1组相比,EBSS组、EBSS+Baf-A1组细胞中ATG2A蛋白相对表达量均显著升高(P均<0.05);EBSS组细胞中ATG9A蛋白相对表达量均高于其余三组(P均<0.05);EBSS组细胞中P62蛋白相对表达量均低于其余三组(P均<0.05),EBSS+Baf-A1组P62蛋白相对表达量低于对照组(P均<0.05);EBSS组细胞中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ均低于其余三组(P均<0.05),EBSS+Baf-A1组LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ均高于其余三组(P均<0.05)。结论 EBSS成功诱导MDA-MB-231细胞发生自噬,饥饿诱导的MDA-MB-231细胞自噬过程中ATG2A、ATG9A mRNA和蛋白表达升高。

• 单位
  大理大学