突变A53Tα-synuclein基因核输入信号和核输出信号真核载体的构建及表达分析

作者:王颖; 钱进军; 赵康仁; 马瑞; 徐敏芳; 熊御云; 高静
来源:细胞与分子免疫学杂志, 2011, (06): 618-620.
DOI:10.13423/j.cnki.cjcmi.005995

摘要

目的:构建真核表达载体pRK5-A53T-SNCA-NLS、pRK5-A53T-SNCA-NES,瞬时转染SH-SY5Y细胞。方法:PCR扩增法获得含有SalI和NotI的目的片段A53T-SNCA-NLS、A53T-SNCA-NES,SalI、NotI双酶切载体pRK5,线性pRK5与目的片段经ligation high连接,酶切、PCR鉴定重组质粒pRK5-A53T-SNCA-NLS、pRK5-A53T-SNCA-NES。重组质粒通过Lipofactamine2000转染SH-SY5H细胞,免疫荧光法鉴定瞬转细胞。结果:真核表达载体pRK5-A53T-SNCA-NLS、pRK5-A53T-...

  • 单位
    镇江市第四人民医院

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