NGF对人真皮成纤维细胞增殖、细胞周期、胶原合成及迁移影响的体外研究

作者：甘桦丽; 解慧琪; 陈晓禾; 罗静聪

来源：中国修复重建外科杂志, 2009, 23(11): 1350-1354.

• NGF
• 人真皮成纤维细胞
• 细胞增殖
• 细胞周期
• 胶原合成
• 细胞迁移

目的研究NGF对人真皮成纤维细胞增殖、细胞周期、胶原合成和迁移的影响,探讨NGF在创伤修复中的作用。方法采用酶消化法体外分离培养人真皮成纤维细胞,取第3代细胞进行实验。分别加入0、25、50、100、200、400ng/mLNGF,培养48h采用MTT法检测细胞增殖;加入0、100ng/mLNGF,培养48h采用流式细胞仪分析细胞有丝分裂周期,采用羟脯氨酸法检测培养液胶原含量,实时荧光定量PCR测定细胞ColⅠ、ColⅢmRNA表达水平;建立体外细胞划痕创伤模型,加入0、50、100、200ng/mLNGF,培养24h观察细胞迁移。结果MTT法检测结果显示,各浓度组间细胞增殖的吸光度值比较差异均无统计学意义(P>0.05)。在0、100ng/mLNGF作用下,细胞周期显示两组的G0/G1期、S期、G2/M期细胞百分率差异均无统计学意义(P>0.05),羟脯氨酸法测得两组细胞培养液胶原含量和实时荧光定量PCR测定细胞ColⅠ、ColⅢmRNA表达水平差异均无统计学意义(P>0.05)。细胞迁移实验结果显示,培养24h后0、50、100、200ng/mLNGF浓度组细胞迁移率分别为52.12%±6.50%、80.67%±8.51%、66.33%±3.58%和61.19%±0.97%,50、100ng/mLNGF可显著促进细胞迁移(P<0.05)。结论NGF对人真皮成纤维细胞增殖、细胞周期及ColⅠ、ColⅢmRNA表达无影响,不能促进胶原合成,但能促进人真皮成纤维细胞迁移。

• 单位
  生物治疗国家重点实验室; 四川大学华西医院