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摘要
为研究红树莓酵素对伊犁马肠道形态、菌群结构及免疫系统调节作用的机制，本研究选取24匹健康状况良好、遗传背景一致，公母各半的伊犁马，随机平均分为4组，分别为空白对照组、低剂量红树莓酵素添加组（0.1 g/kg）、中剂量红树莓酵素添加组（0.2 g/kg）和高剂量红树莓酵素添加组（0.4 g/kg），实验周期28 d。饲料中给药后观察并计算各组伊犁马的腹泻率，结果显示各实验组与对照组间均无差异（P>0.05），表明红树莓酵素对伊犁马无毒副作用，可以进一步实验。各组饲喂至28 d时选取2匹中等、健康状况良好的伊犁马，麻醉后分离带有食糜的盲肠肠段和小肠肠段，测定其微生物菌群和肠道pH，采用qPCR检测肠组织中纤维素酶关键酶基因melA的转录情况，并进一步观察其组织形态，结果显示，与对照组相比，红树莓酵素添加组伊犁马空肠总菌（大肠杆菌、双歧杆菌和乳酸杆菌）含量和肠道pH值得到显著改善（P<0.05），且呈红树莓酵素剂量依赖性。红树莓酵素添加组马肠组织中纤维素酶基因melA转录水平显著提高，且呈红树莓酵剂量依赖性（P<0.05）。电镜下观察小肠黏膜形态结构结果显示，红树莓酵素高剂量添加组马小肠绒毛排列整齐且密集，长度略有增加，黏膜形态结构明显最优；其次是红树莓酵素中剂量添加组，最后是红树莓酵素低剂量添加组和空白对照组。采集各组马血液分离单核细胞，采用ELISA检测伊犁马单核细胞中细胞因子TNF-α、IFN-β、IL-1β、IL-8的含量；采用qPCR测定各组马血清中免疫相关基因的转录水平。ELISA检测结果显示，与空白对照组相比，各红树莓酵素添加组伊犁马单核细胞中细胞因子IFN-β含量均显著增加（P<0.05），而TNF-α、IL-1β、IL-8含量均显著下降（P<0.05），且呈红树莓酵剂量依赖性。qPCR结果显示，红树莓酵素添加组马血清中免疫相关基因IFN-β的转录水平均显著上调，而免疫相关基因TNF-α、IL-1β、IL-8的转录水平均显著下调，且呈红树莓酵剂量依赖性（P<0.05）。本研究首次证实红树莓酵素可通过改变马肠道p H值使其肠道菌群数量显著优化（P<0.05），改善肠道黏膜形态，且增强伊犁马的免疫力，该研究为马的无抗养殖和疫病防控奠定了基础。
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单位武汉商学院; 四川农业大学
