清脂护肝方对大鼠非酒精性脂肪性肝炎的作用研究

作者：何红梅; 屈莉红; 邵建国; 陈琳; 李民; 张玲燕; 顾春燕

来源：肝脏, 2015, 20(03): 191-197.

DOI：10.14000/j.cnki.issn.1008-1704.2015.03.003

• 清脂护肝方
• 非酒精性脂肪性肝炎
• 肝功能
• 血脂
• SSeCKS、Lyn、Hck、Fgr

目的探讨清脂护肝方对大鼠非酒精性脂肪性肝炎的作用及其机制。方法 58只雄性SD大鼠,均喂养高脂饲料,予以12只作对应。将造模成功的大鼠再随机分为模型组、低剂量、中剂量和高剂量清脂护肝方组,分别给予0.9%NaCl溶液灌胃,清脂护肝方组予清脂护肝方药液灌胃6周;观察记录大鼠的行为表现及体质量变化。干预结束后次日处死所有大鼠并留取血清和肝脏,检测清脂护肝方对NASH大鼠肝生化指标的影响。免疫组织化学方法检测NASH大鼠肝组织中SSeCKS、Hck、Lyn、Fgr的表达水平。体外实验:对库普弗细胞株采用不同浓度不同时间的CCL4刺激,用优选方案的清脂护肝方药物血清培养后检测SSeCKS、Hck、Lyn、Fgr的表达。结果与正常对照组相比,模型组大鼠体重明显增加(P<0.05);模型组ALT、AST、TBIl均较正常对照组升高(P<0.05);模型组TG、CH、LDL均明显上升(P<0.01),HDL亦有所降低(P<0.05)。与模型组相比,中大剂量清脂护肝方组体重均有减轻,其中大剂量组的体重减轻最为明显(P<0.01);清脂护肝方各剂量治疗组ALT与模型组比较明显降低(P<0.01),大剂量治疗组AST与模型组比较明显降低(P<0.01);清脂护肝方中、大剂量组的血清TBIL较模型组显著下降(P<0.01);与模型组比较,清脂护肝方组的TG、LDL有所降低(P<0.05),尤其大剂量组降低相对更明显;清脂护肝方各剂量组CH有所降低,但仅有大剂量组有统计学差异(P<0.05)。ICC结果表明:Lyn、Hck在kupffer细胞中有表达,并与炎症程度呈正相关,清脂护肝方药物血清培养后表达减少,Fgr和SSeCKS在kupffer细胞中无明显表达。ICC结果表明:Hck、Lyn在正常肝脏组织中低表达,模型组中高表达,用药组无论是大、中、小剂量组,在抑制Hck、Lyn两种Src相关激酶成员的阳性表达是有显著效果,特别是大剂量组,与模型组比较有显著意义(P<0.01);模型组SSeCKS蛋白的表达显著低于正常组,在治疗组中的表达介于模型组和正常组,同时伴随Lyn、Hck表达的升高呈减少趋势,提示SSeCKS与Src家族相关激酶(Lyn、Hck)存在某种上下游抑制关系;而清脂护肝方对Fgr的表达无明显影响,用药前后无统计学意义(P>0.05)。结论清脂护肝方能减轻肝脏的炎性反应,明显改善肝功能和血脂指标,其机制可能与SSeCKS、Lyn、Hck信号通路有关,且高剂量时疗效更优。

• 单位
  南通市第三人民医院; 南京中医药大学; 同济大学附属东方医院; 第一临床医学院