沉默FOXC1基因调控Notch通路对脑胶质瘤细胞增殖和凋亡影响

作者：李元元; 朱淑霞^*; 张园园; 张燕燕

来源：中华肿瘤防治杂志, 2019, 26(14): 997-1002.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2019.14.004

• 脑胶质瘤
• U251
• TJ905
• FOXC1
• 细胞凋亡
• 细胞增殖
• 通路蛋白Notch-1
• Dll4

目的脑胶质瘤具有高发病率和高度恶性,目前的治疗方法效果不理想,且易复发。近年来,基因治疗逐渐被认识及广泛研究,但具体靶点及作用机制尚无定论。本研究探讨了siRNA靶向沉默FOXC1基因调控Notch通路对脑胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法根据前期实验,选择靶向沉默FOXC1基因效率最高的siRNA序列(FOXC1-siRNA-1707,实验组)和阴性对照序列(FOXC1-siRNA-NC,阴性对照组),用LipofectamineTM 2000 DNA转染试剂转染U251和TJ905 2种人胶质瘤细胞。MTT法分析6、12、24和48 h不同时间点细胞增殖变化。流式细胞术检测脑胶质瘤细胞凋亡率(亚凋亡峰值)。蛋白质印迹法检测沉默FOXC1基因后Notch-1和D114蛋白水平的变化。结果 MTT分析表明,在脑胶质瘤U251细胞中,实验组细胞增殖率与对照组、阴性对照组相比降低,且具有时间依赖性,差异均有统计学意义,F处理组=80 169.8,F时间=115 031.3,F处理组×时间=5 604.1,均P<0.05;与对照组相比,阴性对照组细胞增殖率降低,但差异无统计学意义,P>0.05。在脑胶质瘤TJ905细胞中,实验组细胞增殖率与对照组、阴性对照组相比降低,且具有时间依赖性,差异均有统计学意义,F处理组=111 037.1,F时间=153 277.7,F处理组×时间=5 208.2,均P<0.05;与对照组相比,阴性对照组细胞增殖率降低,但差异无统计学意义,P>0.05。流式细胞仪检测结果表明,U251细胞中FOXC1基因沉默后,脑胶质瘤细胞凋亡率增加,差异有统计学意义,F=155.9,P<0.01;TJ905细胞中FOXC1基因沉默后,脑胶质瘤细胞凋亡率增加,差异有统计学意义,F=243.1,P<0.01。蛋白质印迹法结果显示,U251细胞中靶向沉默FOXC1基因后,Notch1和Dll4蛋白的表达水平下降,差异有统计学意义,F值分别为7.4、12.3,均P<0.05;TJ905细胞中靶向沉默FOXC1基因后,Notch 1和D114蛋白的表达水平亦下降,差异有统计学意义,F值分别为8.7、19.2,均P<0.05。结论沉默FOXC1基因可以抑制脑胶质瘤细胞的增殖,促进其凋亡,其机制可能与调控Notch通路相关。

• 单位
  滨州医学院附属医院