脐血间充质干细胞经转染绿色荧光蛋白后治疗SCID小鼠烫伤的创面效应示踪

作者：曲丽媛; 李梦文; 李振明; 潘希贵; 王鑫^*

来源：国际检验医学杂志, 2019, 40(04): 423-426.

• 间充质干细胞
• 移植
• 绿色荧光蛋白
• 荧光示踪

目的利用该实验室先期已建成的人脐血源间充质干细胞株(FUCB-MSCs),标记上增强型绿色荧光蛋白(EGFP),以对烫伤SCID小鼠行外源性FUCB-MSCs移植治疗的创面区进行移植效应示踪。方法FUCB-MSCs经腺病毒转染标记GFP;建立深Ⅱ度烫伤SCID小鼠模型,将小鼠随机分为低剂量移植组、高剂量移植组和空白对照组,每组6只,每只2个创面,共12个创面,分别将转染后的GFP-MSCs按照0.2mL 1×106个、0.2mL 2×106个以及等体积培养基通过尾静脉注射的方式进行创面移植。移植9d后取各组创面组织行冰冻切片HE染色,比较各组创面面积和创面细胞数,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达和创面修复损伤情况。结果 FUCB-MSCs经逆转录病毒感染后,48h荧光显微镜下可见到EGFP表达,阳性率在80%以上,且6周后仍能观察到GFP稳定表达,移植后创面部位可观察到人源性GFP阳性表达,移植3周后荧光未见衰减;移植标记了GFP的FUCB-MSCs后SCID小鼠未出现排斥反应,低剂量组、高剂量组与对照组比较,在创面面积和细胞数上差异均有统计学意义(P<0.05),可提示尾静脉移植注射的GFP-FUCB-MSCs参与了创面愈合。结论利用GFP对人脐血源间充质干细胞移植治疗过程中的标记示踪,表明烫伤后外源性FUCB-MSCs可通过SCID小鼠血液循环系统,迁移聚集到烫伤创面持续参与修复。

• 单位
  中心实验室