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摘要
目的构建猪链球菌2型Δ0948互补株, 验证对溶血素分泌和毒力的影响。方法 PCR扩增带启动子的SSU050948基因序列并连接至pAT18载体构建互补株, Western blot验证表达情况;绘制生长曲线比较互补株和野生株、突变株在不同时期的生长情况;CD1小鼠攻毒模型验证互补株能否恢复突变株毒力;溶血素(SLY)溶血活性及Western blot比较互补株和野生株、突变株不同时间点对SLY蛋白分泌的影响。结果互补株构建成功但SSU050948基因的表达低于野生株;互补株在对数生长期的生长速度明显慢于野生株和突变株, 但在平台期一致;CD1小鼠毒力试验证明互补株可以基本恢复突变株毒力;SLY蛋白溶血活性及Western blot实验证明SSU050948在对数期早中期可以抑制SLY蛋白的分泌, 而在对数期晚期及平台期则不影响SLY蛋白的分泌, 互补株可以恢复SLY蛋白的分泌。结论猪链球菌互补株CΔ0948能够恢复突变株Δ0948的毒力, SSU050948影响SLY蛋白的分泌, 为猪链球菌防治提供新思路。
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单位中国医学科学院; 北京医院
