精子孵育时间及培养液成分对小鼠体外受精和胚胎发育的影响

作者：华月琴; 陈瑞华; 吴志南; 沈宗姬

来源：苏州大学学报(医学版), 2009, 29(04): 647-649+659.

• 精子孵育时间
• 培养液
• 体外受精
• 小鼠胚胎

目的探讨精子孵育时间及培养液成分对小鼠体外受精和胚胎发育的影响,为人类辅助生殖技术完善质量控制体系创建可靠的平台。方法将精子获能时间分为3组,分别为0.5、1和2h,用HTF+10%SSS和HTF+10%FCS两种获能受精液,ICR雄鼠附睾尾的精子与成熟卵母细胞进行体外受精(IVF)。受精卵分别用IVC-ONE+10%SSS、IVC-ONE+10%FCS、HTF+10%FCS和HTF+10%SSS4种培养液对体外受精胚胎进行培养。结果结果获能时间为0.5h时,卵母细胞的受精率显著高于其他组,差异有高度统计学意义(P<0.01);获能时间若超过1h,受精率明显下降。胚胎用IVC-ONE+10%FCS培养液进行培养时囊胚率和囊胚孵出率(89%和40%)显著高于IVC-ONE+10%SSS(51%和29%)、HTF+10%FCS(11%和2%)和HTF+10%SSS(11%和0%),差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论小鼠体外受精时,宜选用HTF受精液,并获能0.5h;小鼠体外受精卵进行培养,以含10%FCS的IVC+ONE为胚胎培养液,可获得较高的囊胚率,葡萄糖并不是小鼠胚胎形成囊胚所必需的;在含磷酸盐的培养液中EDTA不能有效克服ICR2-cell的体外发育阻滞现象。

• 单位
  苏州大学附属第一医院