miRNA-124-3p抑制剂通过Wnt/β-catenin信号通路调节缺氧缺糖心肌细胞凋亡的研究

作者：马彦娟; 任芳; 李闯; 陈希妍; 杨平; 石金河^*

来源：重庆医学, 2021, 50(03): 378-382.

• 微小RNA-124-3p
• Wnt信号通路
• 缺氧缺糖
• 肌细胞,心脏
• 细胞凋亡

目的利用缺氧缺糖(OGD)诱导心肌细胞损伤的模型,探讨miRNA-124-3p抑制剂对Wnt/β-catenin信号通路及心肌细胞凋亡的影响。方法利用低氧培养箱与低糖DMEM培养基建立OGD细胞模型,细胞分为正常对照组、OGD组、NC-siRNA组、miRNA-124-3p抑制剂组和Wnt1siRNA组,利用Western blot检测miRNA-124-3p抑制剂与Wnt1siRNA对模型细胞中Wnt1及β-catenin表达的影响;利用CCK-8实验检测miRNA-124-3p抑制剂与Wnt1siRNA对心肌细胞活性的影响;利用Western blot检测miRNA-124-3p抑制剂与Wnt1siRNA对凋亡相关的蛋白p53、Bcl-2、Bax及裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)的影响。利用ELISA检测各组细胞悬液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6与IL-1β的水平。结果 miRNA-124-3p抑制剂组和Wnt1siRNA组心肌细胞Wnt1及β-catenin表达水平降低。CCK-8检测结果显示,与OGD组比较,miRNA-124-3p抑制剂组和Wnt1siRNA组心肌细胞活性增高,而二者比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot结果显示,与OGD组比较,miRNA-124-3p抑制剂组和Wnt1siRNA组p53、Bcl-2表达水平升高,Bax及cleaved-caspase-3蛋白表达水平降低,而二者比较,差异无统计学意义(P>0.05)。ELISA结果显示,miRNA-124-3p抑制剂组和Wnt1siRNA组TNF-α、IL-6与IL-1β水平降低,而二者比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miRNA-124-3p抑制剂通过调节Wnt1及β-catenin表达来调控Wnt/β-catenin信号通路,进而调控OGD条件下诱导的心肌细胞的凋亡,减轻细胞损伤,降低炎性因子的释放,发挥心肌保护作用。

• 单位
  新乡医学院第一附属医院