逆转录病毒介导的靶向人Slingshot-1L基因稳定转染人骨髓间充质干细胞系的建立

作者：张慕蕊; 王岩; 马英智; 赵东旭; 杨旭芳; 李玉林

来源：中国老年学杂志, 2010, (03): 330-332.

• 逆转录病毒
• 稳定转染
• 干细胞 Retrovirus vector
• Stable transfected cell line
• Stem cells

目的建立过表达该基因的人骨髓间充质干细胞(hMSCs)稳定转染细胞系。方法采用密度梯度离心法联合贴壁培养法分离、纯化hMSCs。应用脂质体法将Slingshot-1L重组逆转录病毒载体pLNCX-Slingshot-1L转染PA317包装细胞,G418筛选,滴度测定。收集病毒上清感染第2代hMSCs,G418筛选,挑选阳性克隆,扩增培养。结果采用密度梯度离心法联合贴壁培养法成功分离、纯化了hMSCs,应用pLNCX-Slingshot-1L重组逆转录病毒载体转染PA317包装细胞,获得滴度为5×108CFU/L的病毒上清。收集病毒上清感染hMSCs,获得了过表达Slingshot-1L基因的h...

• 单位
  吉林大学白求恩医学院; 吉林大学中日联谊医院