表达PEDV S蛋白重组仙台病毒的构建及其免疫原性研究

作者：邹静娴; 孟慧; 潘朔楠; 陈振海; 牟春晓^*

来源：扬州大学学报（农业与生命科学版）, 2023, 44(04): 43-67.

DOI：10.16872/j.cnki.1671-4652.2023.04.06

• 猪流行性腹泻
• S蛋白
• 重组仙台病毒
• 免疫原性

为构建表达猪流行性腹泻病毒(PEDV) S蛋白的重组仙台病毒(SeV),并评价其诱导的特异性免疫应答反应，利用PCR扩增得到PEDV中国流行株的全长S基因，构建含S基因的重组仙台病毒感染性克隆质粒(pBeloBAC-SeV-PEDV-S),并拯救重组病毒SeV-PEDV-S。对重组病毒进行鉴定并测定其生长曲线以确定成功获得表达PEDV S蛋白的重组仙台病毒。将表达S蛋白的仙台病毒免疫小鼠；间接免疫荧光和Western blot试验检测血清中特异性抗体的产生；利用脾脏淋巴细胞分离和流式细胞技术检测特异性T淋巴细胞增殖反应；对血清中的中和抗体效价进行评价。结果表明：重组仙台病毒能特异性表达PEDV S蛋白，且与野生型仙台病毒有一致的生长曲线；免疫小鼠后，重组仙台病毒能有效刺激小鼠产生特异性抗体，诱导较高的中和抗体水平，且能显著促进PEDV特异性T淋巴细胞增殖。综上，该试验为进一步研究重组仙台病毒在猪体上的免疫反应奠定了基础，也为新一代安全有效的PEDV活载体疫苗的研发提供了策略。

• 单位
  扬州大学