农杆菌介导的小孢拟盘多毛孢遗传转化及突变体筛选

作者：邓蕾; 冯丹丹; 汪祖鹏; 潘慧; 钟彩虹^*; 李黎^*

来源：菌物学报, 2021, 40(09): 2355-2363.

DOI：10.13346/j.mycosystema.210120

• 绿色荧光蛋白(GFP)
• 转化子
• 转化效率
• 致病力

本研究通过农杆菌EHA105介导的方法,以含潮霉素抗性基因和GFP基因的双元载体p CAMBgfp为转化载体,对小孢拟盘多毛孢Pestalotiopsis microspora KFRD-2菌株进行遗传转化。基于潮霉素及GFP荧光抗性进行转化子的初步筛选,随后,进一步对转化子的菌落特征、菌丝生长速率、产孢量、荧光稳定性及致病力进行验证。结果获得阳性转化子100余株,转化效率达200个转化子/106个孢子。大部分转化子与野生型菌株无明显形态及致病力差异。同时,获得了14株菌丝形态、产孢量或致病力与野生型存在明显差异的突变株,可用于小孢拟盘多毛孢关键致病基因的挖掘验证及致病机理等研究。

• 单位
  中国科学院; 中国科学院武汉植物园