RNA聚合酶Ⅱ转录的ALU对PKR磷酸化的调节作用

作者：杨梅; 沈薇; 吴进峰; 曾贵利; 王峰; 任红; 唐开福

来源：中国生物制品学杂志, 2010, (01): 22-24.

DOI：10.13200/j.cjb.2010.01.28.yangm.001

• ALU序列
• 依赖于双股RNA的蛋白激酶
• 磷酸化
• RNA聚合酶Ⅱ
• RNA聚合酶Ⅲ
• 干扰素 ALU sequence
• Double-stranded RNA-dependent protein kinase(Protein kinase R
• PKR)
• Phosphorylation
• RNA polymerase Ⅱ(Pol Ⅱ)
• RNA polymerase Ⅲ(Pol Ⅲ)
• Interferon

目的研究ALU自身的RNA聚合酶Ⅲ启动子对RNA聚合酶Ⅱ转录的影响,探讨RNA聚合酶Ⅱ转录的ALU对PKR磷酸化的调节作用。方法将ALU全基因序列插入pcDNA3.1(-)载体的CMV启动子(一个RNA聚合酶Ⅱ启动子)的下游,构建重组质粒pcDNA3.1-ALU;转染HEK293细胞,提取细胞总RNA,RT-PCR筛选稳定表达ALU的细胞;用干扰素处理稳定表达ALU序列的细胞,Western blot法检测PKR的磷酸化水平。结果ALU全基因序列插入pcDNA3.1载体的CMV启动子直接下游,能够被RNA聚合酶Ⅱ有效转录;在稳定表达ALU的HEK293细胞中,加干扰素与未加干扰素组PKR的磷酸...

• 单位
  重庆医科大学附属第二医院