K亚群禽白血病病毒CRISPR/Cas13a检测方法的建立及初步应用全文替换

作者：徐晴晴^*; 王峰; 王文秀; 莫玲; 沈志强^*

来源：中国动物传染病学报, 2023, 31(03): 113-119.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20220601.001

• K亚群禽白血病病毒
• RPA
• crRNA
• CRISPR/Cas13a

为了快速、准确和简便地检测K亚群禽白血病病毒（ALV-K），本研究参照GenBank中ALV-K的gp85基因设计了特异的RPA引物和用于LwCas13a反应系统的crRNA，通过优化反应条件建立了检测ALV-K的CRISPR/Cas13a方法，并验证了该方法的特异性、敏感性和符合性。结果显示，该法对感染鸡的其他常见病毒的检测均为阴性，特异性良好无交叉反应；灵敏度为50copies/μL；与PCR的检测结果有很好的符合性。本研究建立的CRISPR/Cas13a检测方法配合试纸条显色在1.5h左右可对ALV-K进行快速的鉴别诊断，为该病的诊断及防控净化提供了强有力的技术支撑。

• 单位
  山东省滨州畜牧兽医研究院; 扬州大学