摘要
[目的]将羊胎盘肽粗品按照不同的分子量段进行划分,计算出不同分段的分子量分布,研究不同分子量段的羊胎盘肽对大鼠L6骨骼肌成肌细胞增殖能力和三磷酸腺苷(ATP(浓度的影响。[方法]采用凝胶过滤色谱法,将羊胎盘肽粗品进行分离,划分为不同的分子量段,以噻坐蓝(MTT)比色法检测不同分段羊胎盘肽对大鼠L6骨骼肌成肌细胞增殖的影响,并且采用增强型ATP检测试剂盒检测其对L6成肌细胞的ATP含量的影响。[结果]凝胶过滤色谱法分离羊胎盘肽划分为六段,其中F5、F6已不属于多肽或者氨基酸,故去除。MTT结果显示SPP(羊胎盘肽粗品)、F1、F2、F3均对大鼠L6骨骼肌成肌细胞增殖出现促进作用,其中羊胎盘中的组分F3促增殖作用最为显著;F4则出现轻微抑制的作用。最终确定除F3选用5μg/mL以外,其他各组均选用20μg/mL的加药浓度进行ATP浓度的检测。经过ATP实验,SPP和F3显著性促进骨骼肌成肌细胞的ATP浓度的升高(P<0.01),并且F3比SPP效果更好。而F1、F2和F4则促进ATP产生的作用并不显著。[结论] SPP以及其中的的F1、F2、F3、F4对于L6骨骼肌成肌细胞增殖能力的影响和ATP浓度的影响较为一致。其中,F3很可能是羊胎盘肽中的活性最好的部分,即分子量在260~89Da的部分。
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