长型肌球蛋白轻链激酶4Ig结构域的表达及单克隆抗体的制备

作者：吕宁; 朱春花; 张文程; 朱敏生; 陈华群

来源：南京师大学报(自然科学版), 2008, 31(04): 124-128.

DOI：10.3969/j.issn.1001-4616.2008.04.026

• MLCK4Ig
• 蛋白表达
• 单克隆抗体

长型肌球蛋白轻链激酶(long myosin light chain kinase,L-MLCK)及其分子内结构域的功能还不清楚.在研究其功能时,特异性抗体是一基本工具,但目前国际上还没有制备成功特异性较好的抗体.为此,我们先在大肠杆菌E.coliBL21中重组表达了鸡L-MLCK的4Ig蛋白片段(MLCK4Ig),蛋白经纯化后作为抗原免疫小鼠.在小鼠血清中检测到特异性抗体的基础上,建立了2株杂交瘤细胞株,获得抗鸡MLCK4Ig的单克隆抗体.该抗体可以特异与鸡L-MLCK和鸡MLCK4Ig反应.本文并对该抗体的特性及应用进行了讨论.结果表明,我们部分解决了L-MLCK的抗体缺乏问题,为研究L-MLCK及MLCK4Ig片段的功能提供了重要工具.

• 单位
  生命科学学院; 南京大学; 南京师范大学