摘要
目的探讨miR-203a-3p靶向Jun二聚化蛋白(JDP)2基因对结肠癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法将miR-con组(转染miR-con)、miR-203a-3p组(转染miR-203a-3p mimics)、anti-miR-203a-3p组(转染anti-miR-203a-3p)、anti-miR-con组(转染anti-miR-con)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-JDP2组(转染pcDNA-JDP2)、anti-miR-203a-3p+si-con组(共转染anti-miR-203a-3p和si-con)、anti-miR-203a-3p+si-JDP2组(共转染anti-miR-203a-3p和si-JDP2)、miR-con+野生型3′URT-荧光素酶表达载体(JDP2-WT)组(共转染miR-con和JDP2-WT)、miR-con+突变型3′URT-荧光素酶表达载体(JDP2-MUT)组(共转染miR-con和JDP2-MUT)、miR-203a-3p+JDP2-WT组(共转染miR-203a-3p和JDP2-WT)、miR-203a-3p+JDP2-MUT组(共转染miR-203a-3p和JDP2-MUT),均用脂质体法转染至结肠癌HT29细胞中;采用qRT-PCR检测miR-203a-3p和JDP2 mRNA表达水平;Western印迹检测蛋白表达;噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性;Transwell检测各组细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果与人正常结肠黏膜上皮细胞NCM460相比,结肠癌细胞SW480、 SW620、LOVO和HT29中miR-203a-3p表达水平显著升高,JDP2表达水平显著降低(P<0.05);干扰miR-203a-3p表达、过表达JDP2均可抑制HT29细胞增殖、迁移和侵袭,并下调基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、周期蛋白依赖性激酶(CDK)4及细胞周期蛋白(Cyclin)D1蛋白表达(P<0.05)。miR-203a-3p靶向调控JDP2的表达,干扰miR-203a-3p抑制HT29细胞增殖、迁移和侵袭的结果被沉默JDP2表达所逆转,沉默JDP2表达能够减弱干扰miR-203a-3p对HT29细胞抗增殖、抗迁移、抗侵袭作用。结论干扰miR-203a-3p对结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭具有抑制作用,其机制可能与靶向调控JDP2有关。
-
单位山东大学齐鲁医院