摘要
目的:观察艾灸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠结肠组织miR-345-3p、miR-216a-5p、核因子-κB p65(NF-κB p65)表达的影响,探讨艾灸治疗IBS-D的抗炎机制。方法:SD幼鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组、吡咯烷二硫代甲酸铵盐(PDTC)组,每组12只。采用新生仔鼠母子分离联合醋酸灌肠刺激联合慢性束缚法复制IBS-D大鼠模型。艾灸组艾灸“天枢”“上巨虚”,每次20 min,每天1次,治疗7 d。PDTC组腹腔注射PDTC(50 mg·kg-1·d-1),共治疗7 d。观察各组幼鼠体质量、稀便率和腹部回缩反射(AWR)最小容量阈值;HE染色法观察各组幼鼠结肠黏膜层病理形态;ELISA法检测各组幼鼠血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-4、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量;荧光定量PCR法检测各组幼鼠结肠组织中miR-345-3p、miR-216a-5p、NF-κB p65 mRNA表达水平;免疫荧光法检测各组幼鼠结肠组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB p65表达水平。结果:与正常组比较,模型组稀便率升高(P<0.01),体质量、AWR最小容量阈值降低(P<0.01),结肠组织黏膜存在轻度炎性反应,血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量升高(P<0.01),IL-4含量降低(P<0.01),结肠组织miR-345-3p、miR-216a-5p相对表达量降低(P<0.01),NF-κB p65 mRNA相对表达量升高(P<0.01),结肠组织IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB p65免疫荧光平均吸光度值升高(P<0.01)。与模型组比较,艾灸组和PDTC组稀便率降低(P<0.01),体质量、AWR最小容量阈值升高(P<0.01),结肠组织黏膜炎性反应减轻,血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量降低(P<0.01),IL-4含量升高(P<0.01),结肠组织miR-345-3p、miR-216a-5p相对表达量升高(P<0.05),NF-κB p65 mRNA相对表达量降低(P<0.01),结肠组织IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB p65免疫荧光平均吸光度值降低(P<0.01)。与艾灸组比较,PDTC组血清IL-6含量降低(P<0.01)。结论:艾灸可以减轻IBS-D大鼠肠道炎性反应水平,降低内脏高敏感性,其机制可能与提高结肠组织miR-345-3p、miR-216a-5p表达水平,抑制NF-κB p65表达水平,从而降低炎性因子水平有关。
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