B-7.1转基因细胞株的表达和检测

作者：刘岩; 王科亮; 杨德军

来源：解剖学研究, 2011, 33(02): 92-94.

DOI：10.3969/j.issn.1008-6455.2011.z1.003

• B-7.1
• 肾细胞癌
• 转基因
• 表达
• 载体

目的构建B-7.1基因真核表达载体并导入CAK-1肾细胞癌细胞表达,为进一步研究基因的功能做材料准备。方法采用RT-PCR方法,以正常肝脏组织cDNA为模板,扩增B-7.1基因全长读码框架,并构建到真核表达载体pCDNA3.1中,将其导入CAK-1肾细胞瘤细胞,对转染后的细胞进行RT-PCR和Western blot分析。结果经过克隆测序结果证实,我们成功将B-7.1读码框架插入真核表达载体pCDNA3.1的相应位点,并且,与pCDNA3空载体转染对照细胞相比,pCDNA3-B-7载体转染的CAK-1细胞中B-7基因无论是mRNA水平还是蛋白水平均有明显升高。结论 B-7.1转基因细胞株的成功构建和检测,为深入研究B-7.1蛋白的生物学功能奠定了材料基础。

• 单位
  哈尔滨医科大学附属第四医院