Rev-erbα在血管内皮损伤后内膜增生中的作用

作者：甘雪晴; 侯娟妮; 李秀川; 孙雄山^*; 杨大春^*

来源：中华老年心脑血管病杂志, 2020, 22(06): 629-634.

• 内皮,血管
• 血管紧张素Ⅱ
• 肌细胞,平滑肌
• 核受体亚家族1,D族,成受1

目的探讨Rev-erbα在血管内皮损伤后内膜增生中的作用。方法将雄性野生型C57BL/6J小鼠80只随机分为假手术1组和2组、激动剂1组、抑制剂1组、损伤1组和2组、激动剂2组和抑制剂2组,每组10只,前4组仅行假手术,后4组用机械损伤颈动脉内皮法构建模型,造模后,按分组分别腹腔注射激动剂SR9011或抑制剂SR8278各100 mg/kg,1次/d,4周。用100 nmol/L血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)干预小鼠主动脉平滑肌细胞系(MOVAS)24 h诱导体外增殖,特异性小分子干扰(siRNA)转染技术敲低细胞中核苷酸结合寡聚化域样受体蛋白3(Nlrp3)水平。将细胞分为对照1组、2组和3组,AngⅡ1组、2组和3组,SR9011组,SR8278组,AngⅡ+SR8278组,siRNA对照组,si-Nlrp3组,SR8278+si-Nlrp3组,后9组用AngⅡ干预24 h,SR9011组和SR8278组先用5μmol/L的SR9011或SR8278干预12 h;后3组用siRNA敲低Nlrp3水平。分别用qRT-PCR和Western blot测Rev-erbα、Nlrp3 mRNA和蛋白表达,苏木精-伊红染色观察颈动脉内膜增生,分别用CCK-8法和Ki-67免疫荧光术测细胞增殖率。结果与假手术1组比较,内皮损伤1组Rev-erbαmRNA及蛋白表达下降(P<0.01)。与假手术2组比较,内皮损伤2组内膜增生更明显(P<0.01)。与内皮损伤2组比较,激动剂2组内膜/中膜面积比值下降(P<0.01);抑制剂2组内膜/中膜面积比值升高(P<0.01)。与对照1组比较,AngⅡ1组Rev-erbαmRNA和蛋白表达下降(P<0.01)。与AngⅡ2组比较,SR9011组吸光度和阳性细胞率减少,SR8278组吸光度和阳性细胞率明显增加(P<0.05)。与对照2组比较,AngⅡ2组Nlrp3 mRNA和蛋白表达增加(P<0.01);与AngⅡ2组比较,SR9011组Nlrp3 mRNA和蛋白表达降低,SR8278组Nlrp3 mRNA和蛋白表达增加(P<0.05)。si-Nlrp3组较siRNA对照组阳性细胞减少[(0.133±0.012)%vs(0.337±0.023)%,P<0.05];SR8278+si-Nlrp3组较AngⅡ+SR8278组阳性细胞减少[(0.138±0.011)%vs(0.498±0.023)%,P<0.05]。结论 Rev-erbα可能通过抑制Nlrp3表达,抑制细胞增殖,抑制血管内皮损伤后内膜增生的进展。

• 单位
  西南医科大学