干扰Kelch样家族蛋白21对黑色素瘤细胞增殖、迁移的影响

作者：郭文娜; 姚亚丽; 张彦婷; 关方霞^*

来源：郑州大学学报(医学版), 2023, 58(01): 50-55.

DOI：10.13705/j.issn.1671-6825.2022.04.002

• 黑色素瘤
• A375细胞
• Kelch样家族蛋白21
• 细胞增殖
• 细胞迁移

目的:研究干扰Kelch样家族蛋白21(KLHL21)后对黑色素瘤细胞增殖和迁移的影响。方法:采用qRT-PCR和Western blot法检测黑色素瘤细胞A375和正常细胞中KLHL21 mRNA和蛋白表达水平。将A375细胞分为3组：正常对照组、siNC组(转染阴性对照siRNA)和siKLHL21组(转染KLHL21特异性siRNA)。转染6 h后，采用CCK-8法、EdU染色法检测细胞增殖能力，采用Transwell小室检测细胞迁移能力。从TCGA数据库下载458例黑色素瘤患者的RNA-seq数据，利用TIME分析黑色素瘤患者中KLHL21表达水平与免疫细胞浸润水平的关系。选择黑色素瘤治疗中常用的8个免疫检查点抑制剂相关基因，应用Spearman相关性分析其与KLHL21表达水平的相关性。结果:黑色素瘤细胞中KLHL21 mRNA和蛋白表达水平均升高。与其他2组相比，siKLHL21组细胞中KLHL21 mRNA和蛋白表达水平降低，细胞增殖、迁移能力降低(P<0.05)。KLHL21表达与免疫浸润性细胞CD4+T细胞浸润水平呈负相关(rS=-0.110,P=0.019),与CD8+T细胞、树突细胞浸润水平呈正相关(rS=0.213、0.143,P<0.05)。基因表达相关性分析显示KLHL21与免疫检查点抑制剂相关基因PD-1、PD-L2、CTLA4、CD4、CD8A和CD80等的表达水平呈负相关(P<0.05)。结论:KLHL21在黑色素瘤细胞中高表达，下调KLHL21表达能够抑制黑色素瘤细胞的增殖和迁移，且KLHL21与免疫检查点相关基因相关。

• 单位
  郑州大学; 生命科学学院