摘要
目的探讨深低温冷冻损伤导致细胞死亡的机制。方法用不同电解质及不同浓度的冷冻保护剂(DMSO)对人肝癌细胞株BEL-7402进行程序降温,至深低温后复苏。采用AnnexinV/PI荧光标记双染色、DNA-Prep stain荧光标记染色,流式细胞术分析冻存前后细胞凋亡、坏死、存活、细胞碎片及BEL-7402细胞周期变化。结果无冷冻保护剂时,冷冻后细胞坏死、碎片明显(P<0.05)。随着离子和DMSO浓度的增加,冷冻后BEL-7402细胞凋亡更趋明显,但细胞坏死、碎片均不明显(P>0.05);冷冻前后细胞周期变化不显著(P>0.05)。结论在冷冻过程中,胞内冰损伤和溶质损伤是导致细胞损伤的独立因素;前者引起细胞死亡的方式是坏死,后者(包括电解质与DMSO)是导致细胞凋亡。冷冻导致的细胞死亡无周期特异性。
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