特异性投射神经元的单细胞分离与测序

作者：谢雯; 周晓娟; 雷婉莹; 张慧; 高艳; 王以政^*; 张春奎^*

来源：神经解剖学杂志, 2023, 39(03): 262-268.

DOI：10.16557/j.cnki.1000-7547.2023.03.002

• 单细胞分离
• 投射神经元
• 单细胞测序
• 丘脑底核
• 丘脑前核
• 小鼠

目的:开发一种适用于特异性投射神经元转录组测序的单细胞分离方法。方法:用逆行示踪腺相关病毒(AAV)特异性标记成年小鼠丘脑底核(STN)投射至丘脑前核(ANT)的神经元，通过梯度离心将其制备成单细胞悬液，利用显微操纵器逐个吸取被荧光标记的神经元，运用Smart-seq2构建基因文库并进行质检和测序。结果:利用该方案成功分离到STN投射至ANT神经元；所构建的cDNA文库质量满足测序要求；通过测序结果比对，在目标神经元内检测到病毒表达的荧光蛋白基因。结论:本研究建立了一种适用于转录组测序的单细胞分离方法，可高效、高质量分离特异性投射神经元，为未来在靶细胞数目稀少的组织样本中进行转录组学研究提供了一种新的方案。

• 单位
  南华大学; 大连医科大学附属第一医院; 神经内科