Slc4a11基因缺失在CHED发病中的作用

作者：邱颖萍; 牛国桢; 刘春雨; 邵玉婷; 毕燕龙^*

来源：同济大学学报(医学版), 2021, 42(06): 752-759.

• Slc4a11基因
• 先天性遗传性角膜内皮营养不良
• 自噬

目的探讨Slc4a11缺失在先天性遗传性角膜内皮营养不良(congenital hereditary endothelial dystrophy, CHED)发病中的作用及其与自噬信号通路的潜在调控关系。方法利用CRISPR/Cas9技术构建Slc4a11基因敲除小鼠模型。以野生型小鼠(wild type, WT)和Slc4a11基因敲除小鼠(knockout, KO)为实验对象,通过Western印迹法、RT-qPCR、茜素红染色、H-E染色、透射电镜评估KO小鼠角膜表型特征的变化。通过Western印迹法和RT-qPCR检测自噬标志物LC3、beclin1、p62在角膜内皮的表达量。透射电镜观察两组小鼠角膜内皮细胞自噬情况。结果 Slc4a11基因敲除小鼠角膜显示与CHED相似的表型特征,包括角膜厚度增加;角膜内皮细胞体积增大,密度减小;后弹力层增厚;角膜内皮空泡形成。KO小鼠与WT小鼠相比,LC3、beclin1的mRNA和蛋白的相对表达量上升,差异有统计学意义(P<0.05),而p62的mRNA和蛋白的相对表达量下降,差异有统计学意义(P<0.05)。KO小鼠角膜内皮细胞内自噬体明显多于WT小鼠。结论利用CRISPR/Cas9技术构建的Slc4a11基因敲除小鼠角膜显示CHED特征的表型。同时Slc4a11缺失通过增强自噬信号通路参与CHED的发病机制。

• 单位
  同济医院; 同济大学