猪瘟病毒E0蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

作者：贾俊杰; 张必凯; 张莉; 谢金鑫; 郭焕成; 龚文杰; 涂长春

来源：动物医学进展, 2016, 37(05): 5-10.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2016.05.002

• 猪瘟病毒
• E0蛋白
• 原核表达
• 多克隆抗体

为表达猪瘟病毒E0蛋白并制备其多克隆抗体,本研究构建E0蛋白的原核表达载体,转化至BL21(DE3)菌株,IPTG诱导表达,亲和层析及切胶回收纯化重组蛋白。SDS-PAGE和Western blot分析显示E0重组蛋白主要以包涵体形式表达,亲和层析纯化获得了E0重组蛋白,用其免疫Balb/c小鼠4次制备E0重组蛋白的多克隆抗体。间接ELISA显示,免疫小鼠血清中E0蛋白抗体效价为1∶50 000。获得的E0蛋白多抗能与病毒感染细胞及E0-EGFP融合表达细胞中天然结构的E0蛋白发生特异性反应。本研究制备的E0重组蛋白及其多克隆抗体为进一步研究E0蛋白的功能和免疫原性奠定了基础。

• 单位
  军事医学科学院军事兽医研究所